研究級(jí)的分光光度計(jì)是利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種儀器分析方法。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子能級(jí)的躍遷,它廣泛用于無(wú)機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的定性和定量分析。
研究級(jí)的分光光度計(jì)和人一樣,有也會(huì)出問題的時(shí)候,有時(shí)候會(huì)導(dǎo)致測(cè)量數(shù)據(jù)產(chǎn)生偏差,所以我們要定期對(duì)儀器進(jìn)行檢測(cè),使儀器一直都在穩(wěn)定準(zhǔn)確的測(cè)量范圍內(nèi)。那么需要哪些測(cè)量呢?一般為以下幾種:
研究級(jí)的分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和波長(zhǎng)重復(fù)性的檢測(cè):
用氧化鈥溶液的241.13、278.10、287.18、333.44、345.47、361.31、416.28、451.30、485.29、536.64和640.52nm的吸收值進(jìn)行檢定。檢定時(shí)先制造4%氧化鈥的10%高氯酸溶液,將儀器波長(zhǎng)設(shè)置為700~200nm規(guī)模,狹縫小于1nm,以空氣為空白,調(diào)度透光率為。取上述氧化鈥溶液,置1cm石英吸收池中,放入樣品光路,以恰當(dāng)?shù)膾呙杷俣戎谱餮趸€溶液的吸收?qǐng)D譜并打印出峰值,與規(guī)矩值相比較。重復(fù)測(cè)定三次,取平均值,核算波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與重復(fù)性。
用鈥玻璃校正片替代氧化鈥溶液,測(cè)定方法同上,其尖銳吸收峰主要有279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、536.2和637.5nm,校正片運(yùn)用前有必要通過(guò)校正。
基線平直度的檢測(cè):
按儀器要求進(jìn)行基線校正后,調(diào)度狹縫2nm,掃描速度中速,取樣間隔1nm,樣品和參比光路均為空氣。在儀器波長(zhǎng)下限處加10nm,波長(zhǎng)上限處減50nm規(guī)模內(nèi)進(jìn)行掃描,丈量圖譜中起始點(diǎn)的吸光度與圖譜中違反起始點(diǎn)Z多的吸光度(即Z大違反點(diǎn))之差即為基線平直度。容許制作的基線在替換光源或?yàn)V光片時(shí)微有跳動(dòng),必要時(shí)可在檢定前再進(jìn)行一次基線校正。
線噪聲和線噪聲的測(cè)定:
儀器設(shè)置為時(shí)間掃描方法,波長(zhǎng)設(shè)置為250nm,狹縫1nm,樣品和參比光路均為空氣,調(diào)整透光率為,用恰當(dāng)?shù)膾呙杷俣茸鰰r(shí)間掃描2分鐘,查詢線的改動(dòng),然后再將擋光塊刺進(jìn)樣品光路,查詢0%線的改動(dòng)2分鐘,讀出各自峰的Z大(谷)值的差,與規(guī)矩值比較。儀器設(shè)置時(shí)間掃描方法,波長(zhǎng)置500nm,按上述方法測(cè)定500nm波長(zhǎng)處的和0%線噪聲。如儀器無(wú)時(shí)間掃描方法,也可將儀器波長(zhǎng)調(diào)至規(guī)矩處,用目視查詢2分鐘,讀出各自峰的Z大(谷)值的差。
吸光度準(zhǔn)確度的檢測(cè):
將儀器波長(zhǎng)設(shè)置于400~200nm,狹縫1nm,先用配對(duì)的吸收池均裝入0.005mol/L硫酸空白溶液,用適宜的掃描速度記載基線或自動(dòng)校正基線,然后再將樣品光路改動(dòng)放0.006%重鉻酸鉀硫酸溶液0.005mol/L硫酸空白溶液,掃描并打印峰谷值,核算吸收系數(shù),重復(fù)測(cè)定三次,取其平均值與規(guī)矩的吸收系數(shù)答應(yīng)規(guī)模進(jìn)行比較,應(yīng)符合表中的規(guī)矩。